Etude immunohistochimique et biologie moléculaire

IMMUNOHISTOCHIMIE

Le profil immunohistochimique est le suivant :

• expression cytoplasmique faible et hétérogène de TRK (plutôt en faveur de NTRK3 que NTRK1)
• l’expression d’un phénotype mélanocytaire complet : SOX10, S100, Melan-A avec HMB45 en gradient.
• Absence de perte d’expression de p16

BIOLOGIE MOLECULAIRE

Le séquençage complet du transcriptome (RNA-seq) a révélé un transcrit de fusion MYO5A::NTRK3, confirmé par l’étude FISH dirigée contre le locus de NTRK3

Diagnostic/Commentaires

INTRODUCTION

Une majorité des tumeurs de Spitz (naevus de Spitz, tumeur de Spitz atypique, tumeur de Spitz maligne) sont associés à des transcrits de fusion.

Depuis la description princeps par Thomas Wiesner et al., le panorama génomique et microscopique des lésions mélanocytaires associées à des fusions (spectre Spitz) s’est affiné avec la description de traits morphologiques spécifiques qui permettent d’orienter les examens molécualires. On dichotomise ainsi les lésions mélanocytaires associées aux fusion de récepteurs des Tyrosines kinases (ALK, ROS1, NTRK1, NTRK3…) et celles associées aux fusion de Sérine-thréonine kinases (MAP3K8, BRAF).

A titre d’exemple, les lésions mélanocytaires associées aux fusion des gènes ALK et ROS1 sont les plus fréquentes et présentent la morphologie prototypique du naevus de Spitz constituée de grands mélanocytes fusiformes, à cytoplasme éosinophile abondant, agencés en grands faisceaux plexiformes plongeants, une silhouette en dôme à pointe inférieure, une fibrose et une hyperplasie épidermique pseudo-épithéliomateuse. Les lésions mélanocytaires associées à des fusions de la Sérine-thréonine kinases MAP3K8 présenteront une morphologie épithélioide, plus d’atypies, des cellules de grande taille multinucléées « monstrocellulaires », des hiatus morphologiques et pigmentaires.

Les lésions mélanocytaires associées aux fusions des différents gènes NTRK présentent des traits morphologiques spécifiques en fonction du gène NTRK1 ou NTRK3 impliqué.  Ainsi, les lésions associées aux fusions de NTRK3 présenteront une morphologie dépendante du partenaire de fusion, avec par ordre de fréquence les gènes MYO5A, ETV6, MYH9 et SQSTM1. Les fusions de NTRK3 sont détectées dans des lésions mélanocytaires étiquetables sur le plan morphologique en Naevus hyperpigmenté à cellules fusiformes de Reed, Naevus de Reed-Spitz, Naevus de Spitz, Tumeur de Spitz atypique,  Les formes composées ou dermiques  associées au transcrit MYO5A::NTRK3 peuvent présenter une morphologie particulière, facile à reconnaitre, pseudo-schwannomateuse illustrée dans le cas présent :

HISTOPATHOLOGIE

Les tumeurs mélanocytaires de Spitz liée aux fusion MYO5A::NTRK3 vont présenter une morphologie différente selon leur mode d’extansion superficiel, dermique ou plexiforme :

• les lésions superficielles se présentent sous la forme de naevus en bande superficielle horizontale hyperpigmntée, avec une cytologie à cellules fusiformes ou en petits nids épithélioïde dermiques superficiels, souvent associé à une hyperpigmentation : il s’agit morphologiquement du naevus de Reed ou Reed-Spitz habituel.
• les lésions composées et dermiques présentent cette même bande superficielle, mais associée à une transition abrupte dans le derme sur un mode fusiforme achromique, avec une organisation nodulaire, densément cellulaire, ressemblant à un Schwannomme. Dans certains cas, des artefacts dissociatifs forment des fentes irrégulières, ressemblant aux vaisseaux ectasiques hemangiopéricytaires constatés dans les tumeurs fibreuses solitaires et constitue un argument assez spécifique. Ces lésions peuvent présenter de discrètes atypies cytonucléaires et une activité mitotique non-nulle.

Le diagnostic est évoqué sur la morphologie et étayé par l’étude immunohistochimique des protéines TRK : l’expression peut être  faible et hétérogène en raison de l’implication du gène NTRK3, contrairement à NTRK1 qui est généralement plus intensément exprimé sur le plan immunohistochimique. Le reste du phénotype mélanocytaire est classique, avec coexpression de tous les marqueurs mélanocytaires SOX10, S100, Melan-A et avec gradient de maturation phénotypique vertical physiologique avec HMB45. L’expression de la P16 n’est pas anormale dans les formes non-atypiques.

Le réarrangement de NTRK3 et la nature du partenaire de fusion pourront être confirmé par une étude FISH ou par séquençage massif & parallèle du transcrit de fusion.

Sur le plan pronostique, des formes atypiques, plus volumineuses, densément cellulaires, de grande taille, avec une activité mitotique renforcée sont décrites. Ces lésions doivent faire l’objet d’un avis en centre expert avec plateau moléculaire pour établir leur profil cytogénétique et préciser leur pronostic sur le plan génomique. La mise en évidence d’une délétion de CDKN2A, et des anomalies structurelles et numéraires permettent de poser un diagnostic de Tumeur de spitz atypique, NTRK3-réarrangée.

PRONOSTIC

Les données de suivi de ces lésions sont pour le moment lacunaire en raison de leur définition récente : la plus large série ne décrit pas de récidive locale ou d’évolution métastatique.Les tumeurs de Spitz associée à d’authentiques réarrangements MYO5A::NTRK3 avec une évolution maligne et léthale ne sont pas décrites dans la littérature à ce jour.

Références

Propositions de diagnostics